Método de Concentración por Sedimentación RITCHIE

Introduccion:
esta practica nos aporto nuevos conocimientos para poder identificar parásitos, practicar para poder identificar los parásitos.

Fundamento:
se basa en la concentración de los quistes y huevos por sedimentación mediante la centrifugación, con la ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios.
unas ventajas que tiene este método es concentrar y no deformar las foras parasitarias, permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal procesada antes de ser examinada, se usa cuando se necesita una técnica para evaluación de tratamiento y determinación de frecuencia.

Material y Equipo:

• centrifuga
• tubos de ensaye cónicos de 15 ml
• gasa cortada en cuadros
• embudos de polietileno
• vasos de precipitado de 50 ml
• aplicadores de madera
• pipetas Pasteur con bulbo
• portaobjetos 
• cubreobjetos
• microscopio
• soluc. Salina isotonica
• soluc.De formaldehido al 10% éter.

Metodo:

a) Con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1 gr. de la materia fecal en el vaso de precipitado, se añaden 10 ml de solución salina y se homogeniza.

b) Se filtra la suspensión a través de la gasa colocada en el embudo, recogiendo el filtrado en el tubo cónico.

c) Se centrifuga la suspensión durante 2 min a 2000 rpm.

d) Se decanta el sobrenadante y se resuspende el sedimento con solusión salina, centrifugado, decantado y resuspendiendo 2 veces más.

e) Al último sedimento se agrega 10 ml de solución de formaldehído al 10%, se mezcla y se deja reposar durante 10 min.

f) Se añade despues 5 ml de éter, se tapan los tubos con tapones de caucho y se agitan enérgeticamente durante 30 segundos.

g) Se centrifuga durante 2 min a 2000 rpm.

h) Despues de centrifugar se observan 4 capas:

• éter en la superficial
• un tapón de restos fecales
• formaldehído
• sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitarios.

i) Se decanta el sobrenadante

j) Se introduce la pipeta Pasteur hasta el sedimento, se extrae con cuidado una gota del sedimento y se coloca en un portaobjetos.

k) Se le añade una gota de lugol y con uno de los ángulos del cubreobjetos, se homogeniza, cubriéndolo con el mismo.

l) Se observa la preparación en el microscopio con objetivos de 10x y 40x.

resultados: 

se encontro quiste de entamoeba histolytica
comentario:
esta practica me parecio más exacta para encontrar parasitos y pues fue una forma nueva que aprendi ya que nunca la habia hecho.

evidencia: