DETERMINACION DE TP & TPT

INTRODUCCIÓN: 

Los factores intrínsecos de la coagulación se activan en presencia de tromboplastina cálcica en plasma citratado; se mide el tiempo transcurrido después de la adición del cloruro calcio (CaCl₂) hasta la formación de coagulo de fibrina.

El tiempo de protombina (TP) o Tiempo de quick ha servido para determinar trastornos de coagulación, TP es la determinación más frecuente junto con la APTT.

MATERIAL:

• Baño maria
• Tubos de ensaye
• Centrifuga
• Pipeta de 200 microlitros
• Plasma

PROCEDIMIENTO:

1.  Introducir la muestra en la centrifuga a 3500  R.P.M.  durante 5 min. para obtener el plasma sanguíneo.
2. Separar 100 microlitros de plasma con ayuda de la pipeta  y depositar  en un tubo de ensaye. 
3. Seguidamente agregar 200 ML de reactivo de TP y tomar el tiempo con un valor de referencia de 13 segundos.
4. Separar 100 microlitros de plasma con ayuda de la pipeta  y depositar  en un tubo de ensaye.
5. Colocar 100 microlitros de reactivo de TPT en el mismo tubo.
6. Meter el tubo de ensaye a incubar en el baño maría durante 3 minutos
7. Al sacarlo inmediatamente agregar 100 microlitros de cloruro de calcio y medir el tiempo en que se forma el coagulo de fibrina con un valor de referencia de 37 segundos.

RESULTADO:

el primer coagulo apareció en 1:05

el segundo coagulo apareció en 42 segundos.

EVIDENCIA:

 COMENTARIO: 

para mi esta practica fue nueva pues nunca había hecho algo así, algo que note es que lleva tiempo por que tarda en el baño maría el reactivo. fue muy interesante y me ayudo a entender más el tema, darme una idea de como se va dando el proceso.

PRUEBA DE LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO DE LA FORMA INVERSA

Introducción: 

El suero del paciente que contiene anticuerpos se pone en contacto con los eritrocitos que contienen antígenos formando un complejo Ag-Ac que se manifiesta microscópicamente mediante una aglutinación.

Material:

• 2 pipetas Pasteur
• 4 tubos de ensaye
• Gradilla 
• Centrifuga 
• Eritrocitos lavados A y B 
• Suero del paciente

Procedimiento:

Se preparan suspensiones de glóbulos rojos al 25 de la siguiente forma, en un tubo de ensaye marcado con la letra A se pone una gota de sangre A y en otro marcado con la letra B se pone una gota de sangre B, se llenan los tubos con solución salina se centrifuga a 3000 r.p.m. durante 3 min. y se decanta el liquido sobrenadante invirtiendo los tubos.

A cada uno de los tubos se añade 1 cm de solución salina.

Se marcan dos tubos de ensaye con la letra A y otro con la B, añadiendo dos gotas de suero.

Añadir a cada tubo una gota de suspensión de eritrocitos al 2 % al tubo A suspensión "A" y al tubo B suspensión "B".

Centrifugar a 1000 r.p.m. durante 2 min.

Sacar los tubos mezclando suavemente e interpretar el resultado.

Interpretación de resultados:

• Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos A significa que tiene Ac B, el suero que tiene Ag A corresponde a la sangre B, el suero problema corresponde a un tipo de sangre del grupo B.
•  Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos B significa que tiene Ac B, el suero que tenga Ag B corresponde a la sangre A, el suero problema corresponde a un tipo de sangre del grupo A.
• Si el suero problema aglutina a  los glóbulos rojos A y B significa que tiene Ac A y B y este corresponde a la sangre O.
• Si el suero problema no aglutina en los globulos rojos A y B, significa que no tiene Ac A ni B, por lo tanto pertnece al grupo AB.

evidencia:

comentario:

esta practica fue fácil de realizar pero se lleva algo de tiempo por centrifugar. se me hizo muy interesante la forma en que hicimos el grupo sanguíneo de forma inversa. me dio otro panorama de esta prueba.