Método de concentración- Flotación de Faust.

introduccion:
sirve para la investigacion de parasitos intestinales en sus quistes o huevecillos, lo que usualmente se conoce con el nombre de examen coproparasitoscopico. el diagnostico de los parasitos intestinales suele depender del hallazgo de huevecillos y larvas de helmitos y de trofozoitos; y quistes de protozoarios. las muestras destinadas para fines diagnosticos deben recogerse y manejarse de manera que en caso de existir parasitos lleguen al laboratorio en un estado que permita su identificación. aprenderemos a identificas huevecillos y larvas, organismos patogenos para el humano.

 fundamento:
Este método se utiliza solución de Zn, cuya densidad específica es de 1.180 (33%), que conforma un medio de densidad más alta que la de los huevos: Necator 1.055, tricocéfalo 1.150, Ascaris fértil 1.110 y facilita que los huevo livianos de estos hemitos, con menor peso específico que la solución, se concentren y floten.
la concentración adecuada aconsejada es la que usa como reactivo una solución acuosa de sulfato Zn al 33% con una densidad al 1.180. El agua utilizada diluye y lava la materia fecal. El filtrado con gasa doblada y evita que los detritos gruesos traspasen las paredes, la centrifugación enriquece en delgada película la superficie del líquido centrifugado con los huevos livianos de algunos helmitos.

materiales:

• tubo de ensayo
• vaso precipitado
• abatelenguas
• gasas
• embudo
• aplicadores de madera
• mechero
• microscopio
• solución de sulfato de  Zn
• solución lugol
• porta y cubre objetos

Técnica:

1. mezclar bien una porción de materia fecal para preparar una superficie en 10 partes de agua destilada.
2. filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de centrífuga, ayudándose con un embudo pequeño.
3. centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1 min.
4. decantar el líquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida anterior, centrifugar nuevamente. Resuspender el sedimento.
5. repetir el procedimiento 2 veces hasta que el líquido sobrenadante este listo.
6. decantar nuevamente el líquido sobrenadante reemplazándolo por igual cantidad de solución de sulfato de Zn al 33%. Mezclar bien la solución con el sedimento. Centrifugar durante 1 min a 1500 rpm.
7. tomar 3-4 gotas de las partículas que flotan en la superficie del líquido. colocarlos en un porta- objeto y mezclarla con 1-2 gotas de lugol, colocar cubre-objeto.
8. examinar al microscopio y reposte sus resultados.

resultados:

encontramos restos de tejido conectivo y clásico, había pocos diplococos y se encontró un quiste de entamoeba hystolitica.

comentario:
esta tecnica se me hace eficiente  para encontrar huevesillos y larvas. dar el tratamiento al paciente. esta tecnica es un poco laboriosa pero muy eficiente. 

evidencia:

C.P.S Directo o en Fresco 2

intriduccion:
como sabemos uno de los primeros microscopistas fue Anton Van Leewenhoek y a mediados del siglo XVII fue el primero en utilizar este metodo al observar directamente en sus propias heces fecales, trofozoitos de Giardia Iamblia.
el metodo que necesita menos equipo y el más sencillo de realizar corresponde a las preparaciones humedas, que se hacen directamente con muestras de heces. para las preparaciones directas de heces frescas o no preservadas, los examenes ordinarios se hacen con solucion salina isotonica ylugol. si se emplean heces preservadas, el formol sirve de diluyente. las preparaciones no teñidas son de especial valor para el estudio de parasitos vivos, como trofozoitos de protozoarios moviles, huevos de helmitos y larvas, con base a sus caracteristicas.
la mexcla normal en el tracto intestinal por lo general no asegura una distribucion uniforme de trofozoitos de protozoarios moviles, huevos de helmitos y larvas de nematodos. sin embargo el examen de materia fecal directo o en fresco puede revelar o no parasitos, dependiendo de la intensidad de la infeccion.

fundamento:
la solucion salina isotonica da las condiciones adecuadas para que la celula se mantenga viva. el medio ideal para todo tipo de parasito que pueda encontrarse en las muestras de heces, en cualquier etapa de su desarrollo, es la solucion salina fisiologica, y el lugol en la practica ha demostrado su eficiencia para la tincion e identificacion de parasitos intestinales.

material:
-muestra fecal
-aplicadores de madera
-portaobjetos de 25x76 mm
-cubreobjetos
-solucion salina isotonica
-lugol parasitologico.

tecnica:
-en un portaobjetos colocar una gota de solucion salina isotonica.
-con la punta del aplicador tomar una pequeña muestra de aproximadamente 1 a 4 mg de heces, en muestras con moco y sangre elegir esta parte para estudiar.
-mezclar, procurando hacer una suspension en preparacion delgada y no un frotis.
-quitar de la suspension fibras y otros fragmentos grandes.
-colocar el cubreobjetos lentamente procurando no dejar burbujas.
-examinar al miscrocopio de forma sistematica, a seco debil y a seco fuerte.
- repetir la operacion con una gota de lugol en lugar de la solucion salina.

ventajas y desventajas:
a) ventajas
-la sencillez y rapidez para llevar a cabo este metodo, ademas de la economia en su realizacion.
-ambos tipos de montaje se pueden preparar en un mismo portaobjetos.
-esta tecnica es la más util para encontrar trofozoitos de amibas y flagelados.
-permite observar la movilidad de los organismos, la cual con mucha frecuencia es caracteristica y sirve para hacer identificacion exacta.
b) desventajas
-las preparaciones con lugol, pueden destruir las formas sensibles como los trofozoitos.
-la muestra utilizada es tan pequeña que es poco representativa.

precauciones:
-una preparacion satisfactoria debe tener densidad ligeramente opaca, pero ser lo bastante delgada que permita leer las letras a traves de esta.
-se deben ver perfectamente los elementos en la preparacion; sin que se dificulte la observacion por el exceso de burbujas y detritos microscopicos.
-en heces liquidas y semiliquidas hay que seleccionar el moco sanguinolento o los esfacelos delgados del tejido y en heces formadas, hacer raspados para obtener material de la superficie en varias partes de la masa fecal.
-utilizar intensidad luminica baja.
-examinar por lo menos tresmuestras antes de considerar negativos los resultados.
-la materia fecal es potencialmente infectante, por lo que se debera tener los cuidados necesarios para su manejo.

autoevaluacion:
¿que es la solucion salina isotonica? : liquido que tiene las caracteristicas y condiciones semejantes a las del cuerpo.

observaciones:
genero y especie del parasito: se encontro una bacteria esterichia coli
estadios vital: ninguno
aumento utilizado: seco debil (10x) y seco fuerte (40x)
estructuras observadas: fibras musculares parcialmente digeridas, restos vegetales.
genero y especie del parasito: quiste de entamoeba histolytica.
estadios vital: ninguno
aumento utilizado: seco debil (10x) y seco fuerte (40x)
estructuras observadas:  celulosa vegetal, tejido elastico, cristales de acidos grazos, celulas llenas de almidon.

conclusiones:
este metodo es muy facil y barato pero no es muy exacto y se tiene que hacer tres o más veces para dar un diagnostico. debemos tener cuidado para que la muestra tampoco quede espesa y no sirva. hay que obtener la muestra de heces con moco y sangre por que ahi estan los parasitos. nuestro paciente no estaba enfermo por eso no encontramos entamoeba histyolitica, pero si esterichia coli (bacteria).

evidencia:

C.P.S. Directo o en fresco

intriduccion:
como sabemos uno de los primeros microscopistas fue Anton Van Leewenhoek y a mediados del siglo XVII fue el primero en utilizar este metodo al observar directamente en sus propias heces fecales, trofozoitos de Giardia Iamblia.
el metodo que necesita menos equipo y el más sencillo de realizar corresponde a las preparaciones humedas, que se hacen directamente con muestras de heces. para las preparaciones directas de heces frescas o no preservadas, los examenes ordinarios se hacen con solucion salina isotonica ylugol. si se emplean heces preservadas, el formol sirve de diluyente. las preparaciones no teñidas son de especial valor para el estudio de parasitos vivos, como trofozoitos de protozoarios moviles, huevos de helmitos y larvas, con base a sus caracteristicas.
la mexcla normal en el tracto intestinal por lo general no asegura una distribucion uniforme de trofozoitos de protozoarios moviles, huevos de helmitos y larvas de nematodos. sin embargo el examen de materia fecal directo o en fresco puede revelar o no parasitos, dependiendo de la intensidad de la infeccion.

fundamento:
la solucion salina isotonica da las condiciones adecuadas para que la celula se mantenga viva. el medio ideal para todo tipo de parasito que pueda encontrarse en las muestras de heces, en cualquier etapa de su desarrollo, es la solucion salina fisiologica, y el lugol en la practica ha demostrado su eficiencia para la tincion e identificacion de parasitos intestinales.

material:
-muestra fecal
-aplicadores de madera
-portaobjetos de 25x76 mm
-cubreobjetos
-solucion salina isotonica
-lugol parasitologico.

tecnica:
-en un portaobjetos colocar una gota de solucion salina isotonica.
-con la punta del aplicador tomar una pequeña muestra de aproximadamente 1 a 4 mg de heces, en muestras con moco y sangre elegir esta parte para estudiar.
-mezclar, procurando hacer una suspension en preparacion delgada y no un frotis.
-quitar de la suspension fibras y otros fragmentos grandes.
-colocar el cubreobjetos lentamente procurando no dejar burbujas.
-examinar al miscrocopio de forma sistematica, a seco debil y a seco fuerte.
- repetir la operacion con una gota de lugol en lugar de la solucion salina.

ventajas y desventajas:
a) ventajas
-la sencillez y rapidez para llevar a cabo este metodo, ademas de la economia en su realizacion.
-ambos tipos de montaje se pueden preparar en un mismo portaobjetos.
-esta tecnica es la más util para encontrar trofozoitos de amibas y flagelados.
-permite observar la movilidad de los organismos, la cual con mucha frecuencia es caracteristica y sirve para hacer identificacion exacta.
b) desventajas
-las preparaciones con lugol, pueden destruir las formas sensibles como los trofozoitos.
-la muestra utilizada es tan pequeña que es poco representativa.

precauciones:
-una preparacion satisfactoria debe tener densidad ligeramente opaca, pero ser lo bastante delgada que permita leer las letras a traves de esta.
-se deben ver perfectamente los elementos en la preparacion; sin que se dificulte la observacion por el exceso de burbujas y detritos microscopicos.
-en heces liquidas y semiliquidas hay que seleccionar el moco sanguinolento o los esfacelos delgados del tejido y en heces formadas, hacer raspados para obtener material de la superficie en varias partes de la masa fecal.
-utilizar intensidad luminica baja.
-examinar por lo menos tresmuestras antes de considerar negativos los resultados.
-la materia fecal es potencialmente infectante, por lo que se debera tener los cuidados necesarios para su manejo.

autoevaluacion:
¿que es la solucion salina isotonica? : liquido que tiene las caracteristicas y condiciones semejantes a las del cuerpo.

observaciones:
genero y especie del parasito: ninguno
estadios vital: ninguno
aumento utilizado: seco debil (10x) y seco fuerte (40x)
estructuras observadas: fibras musculares, restos de comida, grasa, restos vegetales.
genero y especie del parasito: ninguno
estadios vital: ninguno
aumento utilizado: seco debil (10x) y seco fuerte (40x)
estructuras observadas: restos vegetales, fibras.

conclusiones:
este metodo es muy facil y barato pero no es muy exacto y se tiene que hacer tres o más veces para dar un diagnostico. debemos tener cuidado para que la muestra tampoco quede espesa y no sirva. hay que obtener la muestra de heces con moco y sangre por que ahi estan los parasitos. nuestro paciente no estaba enfermo por eso no encontramos entamoeba histyolitica.

evidencias:

hematocrito

objetivo

los alumnos aprenderán a realizar este tipo de practica y conocerán mas sobre el papel que juegan en la sociedad. podrán conocer mas materiales de laboratorio usando el micro y macro-metro.

fundamento

el hematocrito es un examen sanguíneo que mide el porcentaje del volumen de toda la sangre que esta compuesta de glóbulos rojos y de su tamaño. el hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo sanguíneo completo, llamado hemograma. 

materiales:

• tubo de wintrobe graduado de 0-100mm 
• pipetas pasteur 
• equipo para venopunción, el tubo debe de ser color lila
• plastilina o encendedor
• tubo capilar rojo
• centrifuga
• micro centrifuga

procedimiento:

1. si la muestra se tomara en el laboratorio, se le da las previas indicaciones al paciente, se acamoda y se le tranquiliza. una vez que el pacientes se encuentra en condiciones optimas se empieza a identificar la vena. cuando ya se identifico se desinfecta la zona con una torunda con alcohol al 70%, se prosigue a la puncion venosa, la sangre es recogida por el tubo lila que contiene EDTA. y lo mezcla agitandolo de 5-10 veces.
2. con una pipeta pasteur tomamos la sangre del tubo y colocamos la punta hasta el fondo del tubo de wintrobe y empezamos a vaciar, teniendo cuidado de no hacer espuma ni burbujas.
3. meter el tubo de wintrobe con la sangre en la centrifuga a 300 rpm durante 30 min.
4. cuando sale de la centrifuga se leer directamente de la graduación la columna de los glóbulos rojos y anotamos los resultados.
5. introducimos un poco el tubo capilar al tubo donde esta la muestra, este se ira llenando solo. debemos de llenar solo 2/3 del tubo.
6. el espacio que se quedo sin llenar se quemara para meter a la centrifuga, pero cuidando de no quemar la muestra o colocandole solamente plastilina.
7. el tubo de mete en la micro centrifuga durante 5 min a 10 000 rpm  y 12 000 rpm.
8. una vez que es sacado de la micro sentrifuga se procede a leer ya sea por una regla de tres, midiendo la parte roja o por medio de una regleta.

resultados:

• macro: 45%
• micro: 43%

conclusiones:

con el valor de hematocrito se pueden confirmar enfermedades como anemias. se pueden apreciar dos niveles, el de las células sanguíneas que se sedimentan y el plasma.

con esta practica me llevo otro conocimiento más. este es un examen rápido, barato donde se diagnostican enfermedades.