Técnica Macroscópica Coproparasitoscopico (Tamizado)

Fundamento: 

Se fundamenta en el fenómeno de la filtración, utilizando tamices de diferentes diámetros en donde quedan atrapados los parásitos (trematodos, cestodos, nematodos). esta técnica permite observar directamente las características morfológicas de los parásitos adultos, enteros o fraccionados de los metazoarios.

Material y Equipo: 

• 1 coladera de tamiz fino
• 1 abatelenguas
• 1 caja petri
• 1 pinza

Procedimiento: 

1. Colocar pequeñas porciones de materia fecal en la coladera con ayuda del abatelenguas.
2. Dispersar la muestra con el abatelenguas y agregarle agua hasta lograr un tamizado lo más limpio posible.
3. Revisar cuidadosamente las partículas de las heces que hayan quedado en la coladera.
4. Los parásitos encontrados colocarlos en una caja petri con solución salina.
5. Se identifica la parte del parásito o el parásito completo.
6. Se reporta el género y la especie del parásito o parte del parásito.

Resultado: 

Encontramos fibras/restos de alimentos.

Conclusión: 

Esta practica es fácil de elaborar, no requiere mucho tiempo y es un aporte más a nuestros conocimientos.

Evidencia:

Metodo de Concentrcion por Flotacion de WILLIS

Introducción:
este método esta recomendado especialmente para la investigación de protozoarios y helmintos. consiste en preparar la materia fecal con solución saturada de cloruro de sodio.
los huevos y quistes de peso especifico menor que la solución saturada de cloruro de sodio tiende a subir y adherirse a un cubreobjetos colocado en contacto con la superficie del liquido.

Material y Reactivos:

• vaso de precipitado
• embudo
• gasa
• tubo de ensaye
• portaobjetos
• cubreobjetos
• solución saturada de NaCl
• solución de yodo-lugol

Procedimiento:

1. tomar aprox.1 gr de heces fecales con un abateluenguas.
2. colocar la muestra en un vaso de precipitado y mezclar con 10 ml de solución saturada de cloruro de sodio.
3. en un tubo de ensaye filtre la mezcla con una gasa, llenando completamente el tubo.
4. coloque un cubreobjetos sobre el tubo, de manera que el liquido haga contacto con el cubreobjetos.
5. esperar de 5 a 10 min.
6. los quistes o huevos flotaran y quedaran adheridos a la cara del cubreobjetos que esta en contacto con la mezcla.
7. colocar una gota de yodo- lugol sobre un portaobjetos, retirar el cubreobjetos con cuidado para evitar perdida del materias y ponerlo sobre el portaobjetos.
8. examinar la muestra al microscopio con el objetivo de 40x, buscando quistes o huevecillos de parásitos.
9. reportar sus resultados con imágenes.

Resultado: vimos quistes de ascaris lumbricoide

conclusión: es un método muy sencillo y pues como hacerlo por este método.

evidencia:

Método de Concentración por Sedimentación RITCHIE

Introduccion:
esta practica nos aporto nuevos conocimientos para poder identificar parásitos, practicar para poder identificar los parásitos.

Fundamento:
se basa en la concentración de los quistes y huevos por sedimentación mediante la centrifugación, con la ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios.
unas ventajas que tiene este método es concentrar y no deformar las foras parasitarias, permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal procesada antes de ser examinada, se usa cuando se necesita una técnica para evaluación de tratamiento y determinación de frecuencia.

Material y Equipo:

• centrifuga
• tubos de ensaye cónicos de 15 ml
• gasa cortada en cuadros
• embudos de polietileno
• vasos de precipitado de 50 ml
• aplicadores de madera
• pipetas Pasteur con bulbo
• portaobjetos 
• cubreobjetos
• microscopio
• soluc. Salina isotonica
• soluc.De formaldehido al 10% éter.

Metodo:

a) Con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1 gr. de la materia fecal en el vaso de precipitado, se añaden 10 ml de solución salina y se homogeniza.

b) Se filtra la suspensión a través de la gasa colocada en el embudo, recogiendo el filtrado en el tubo cónico.

c) Se centrifuga la suspensión durante 2 min a 2000 rpm.

d) Se decanta el sobrenadante y se resuspende el sedimento con solusión salina, centrifugado, decantado y resuspendiendo 2 veces más.

e) Al último sedimento se agrega 10 ml de solución de formaldehído al 10%, se mezcla y se deja reposar durante 10 min.

f) Se añade despues 5 ml de éter, se tapan los tubos con tapones de caucho y se agitan enérgeticamente durante 30 segundos.

g) Se centrifuga durante 2 min a 2000 rpm.

h) Despues de centrifugar se observan 4 capas:

• éter en la superficial
• un tapón de restos fecales
• formaldehído
• sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitarios.

i) Se decanta el sobrenadante

j) Se introduce la pipeta Pasteur hasta el sedimento, se extrae con cuidado una gota del sedimento y se coloca en un portaobjetos.

k) Se le añade una gota de lugol y con uno de los ángulos del cubreobjetos, se homogeniza, cubriéndolo con el mismo.

l) Se observa la preparación en el microscopio con objetivos de 10x y 40x.

resultados: 

se encontro quiste de entamoeba histolytica
comentario:
esta practica me parecio más exacta para encontrar parasitos y pues fue una forma nueva que aprendi ya que nunca la habia hecho.

evidencia:

Método de Faust - Bis.

introduccion:

sirve para la investigacion de parasitos intestinales en sus quistes o huevecillos, lo que usualmente se conoce con el nombre de examen coproparasitoscopico. el diagnostico de los parasitos intestinales suele depender del hallazgo de huevecillos y larvas de helmitos y de trofozoitos; y quistes de protozoarios. las muestras destinadas para fines diagnosticos deben recogerse y manejarse de manera que en caso de existir parasitos lleguen al laboratorio en un estado que permita su identificación. aprenderemos a identificas huevecillos y larvas, organismos patogenos para el humano.

 fundamento:
Este método se utiliza solución de Zn, cuya densidad específica es de 1.180 (33%), que conforma un medio de densidad más alta que la de los huevos: Necator 1.055, tricocéfalo 1.150, Ascaris fértil 1.110 y facilita que los huevo livianos de estos hemitos, con menor peso específico que la solución, se concentren y floten.
la concentración adecuada aconsejada es la que usa como reactivo una solución acuosa de sulfato Zn al 33% con una densidad al 1.180. El agua utilizada diluye y lava la materia fecal. El filtrado con gasa doblada y evita que los detritos gruesos traspasen las paredes, la centrifugación enriquece en delgada película la superficie del líquido centrifugado con los huevos livianos de algunos helmitos.

materiales:

• tubo de ensayo
• vaso precipitado
• abatelenguas
• gasas
• embudo
• aplicadores de madera
• mechero
• microscopio
• solución de sulfato de  Zn
• solución lugol
• porta y cubre objetos

Técnica:

1. mezclar bien una porción de materia fecal para preparar una superficie en 10 partes de agua destilada.
2. filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de centrífuga, ayudándose con un embudo pequeño.
3. centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1 min.
4. decantar el líquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida anterior, centrifugar nuevamente. Resuspender el sedimento.
5. repetir el procedimiento 2 veces hasta que el líquido sobrenadante este listo.
6. decantar nuevamente el líquido sobrenadante reemplazándolo por igual cantidad de solución de sulfato de Zn al 33%. Mezclar bien la solución con el sedimento. Centrifugar durante 1 min a 1500 rpm.
7. tomar 3-4 gotas de las partículas que flotan en la superficie del líquido. colocarlos en un porta- objeto y mezclarla con 1-2 gotas de lugol, colocar cubre-objeto.
8. examinar al microscopio y reposte sus resultados.

resultados: nosotros en esta segunda practica encontramos quistes de Entamoeba Coli, restos vegetales, fibras y tejido conectivo.

comentario: esta segunda practica nos ayudo a tener mejor conocimiento de esto, a practicar y reforsarlo para poder hacer practica de ello en lo laboral. 

evidencia: 

Método de concentración- Flotación de Faust.

introduccion:
sirve para la investigacion de parasitos intestinales en sus quistes o huevecillos, lo que usualmente se conoce con el nombre de examen coproparasitoscopico. el diagnostico de los parasitos intestinales suele depender del hallazgo de huevecillos y larvas de helmitos y de trofozoitos; y quistes de protozoarios. las muestras destinadas para fines diagnosticos deben recogerse y manejarse de manera que en caso de existir parasitos lleguen al laboratorio en un estado que permita su identificación. aprenderemos a identificas huevecillos y larvas, organismos patogenos para el humano.

 fundamento:
Este método se utiliza solución de Zn, cuya densidad específica es de 1.180 (33%), que conforma un medio de densidad más alta que la de los huevos: Necator 1.055, tricocéfalo 1.150, Ascaris fértil 1.110 y facilita que los huevo livianos de estos hemitos, con menor peso específico que la solución, se concentren y floten.
la concentración adecuada aconsejada es la que usa como reactivo una solución acuosa de sulfato Zn al 33% con una densidad al 1.180. El agua utilizada diluye y lava la materia fecal. El filtrado con gasa doblada y evita que los detritos gruesos traspasen las paredes, la centrifugación enriquece en delgada película la superficie del líquido centrifugado con los huevos livianos de algunos helmitos.

materiales:

• tubo de ensayo
• vaso precipitado
• abatelenguas
• gasas
• embudo
• aplicadores de madera
• mechero
• microscopio
• solución de sulfato de  Zn
• solución lugol
• porta y cubre objetos

Técnica:

1. mezclar bien una porción de materia fecal para preparar una superficie en 10 partes de agua destilada.
2. filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de centrífuga, ayudándose con un embudo pequeño.
3. centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1 min.
4. decantar el líquido sobrenadante y completar con agua hasta igualar la medida anterior, centrifugar nuevamente. Resuspender el sedimento.
5. repetir el procedimiento 2 veces hasta que el líquido sobrenadante este listo.
6. decantar nuevamente el líquido sobrenadante reemplazándolo por igual cantidad de solución de sulfato de Zn al 33%. Mezclar bien la solución con el sedimento. Centrifugar durante 1 min a 1500 rpm.
7. tomar 3-4 gotas de las partículas que flotan en la superficie del líquido. colocarlos en un porta- objeto y mezclarla con 1-2 gotas de lugol, colocar cubre-objeto.
8. examinar al microscopio y reposte sus resultados.

resultados:

encontramos restos de tejido conectivo y clásico, había pocos diplococos y se encontró un quiste de entamoeba hystolitica.

comentario:
esta tecnica se me hace eficiente  para encontrar huevesillos y larvas. dar el tratamiento al paciente. esta tecnica es un poco laboriosa pero muy eficiente. 

evidencia:

C.P.S Directo o en Fresco 2

intriduccion:
como sabemos uno de los primeros microscopistas fue Anton Van Leewenhoek y a mediados del siglo XVII fue el primero en utilizar este metodo al observar directamente en sus propias heces fecales, trofozoitos de Giardia Iamblia.
el metodo que necesita menos equipo y el más sencillo de realizar corresponde a las preparaciones humedas, que se hacen directamente con muestras de heces. para las preparaciones directas de heces frescas o no preservadas, los examenes ordinarios se hacen con solucion salina isotonica ylugol. si se emplean heces preservadas, el formol sirve de diluyente. las preparaciones no teñidas son de especial valor para el estudio de parasitos vivos, como trofozoitos de protozoarios moviles, huevos de helmitos y larvas, con base a sus caracteristicas.
la mexcla normal en el tracto intestinal por lo general no asegura una distribucion uniforme de trofozoitos de protozoarios moviles, huevos de helmitos y larvas de nematodos. sin embargo el examen de materia fecal directo o en fresco puede revelar o no parasitos, dependiendo de la intensidad de la infeccion.

fundamento:
la solucion salina isotonica da las condiciones adecuadas para que la celula se mantenga viva. el medio ideal para todo tipo de parasito que pueda encontrarse en las muestras de heces, en cualquier etapa de su desarrollo, es la solucion salina fisiologica, y el lugol en la practica ha demostrado su eficiencia para la tincion e identificacion de parasitos intestinales.

material:
-muestra fecal
-aplicadores de madera
-portaobjetos de 25x76 mm
-cubreobjetos
-solucion salina isotonica
-lugol parasitologico.

tecnica:
-en un portaobjetos colocar una gota de solucion salina isotonica.
-con la punta del aplicador tomar una pequeña muestra de aproximadamente 1 a 4 mg de heces, en muestras con moco y sangre elegir esta parte para estudiar.
-mezclar, procurando hacer una suspension en preparacion delgada y no un frotis.
-quitar de la suspension fibras y otros fragmentos grandes.
-colocar el cubreobjetos lentamente procurando no dejar burbujas.
-examinar al miscrocopio de forma sistematica, a seco debil y a seco fuerte.
- repetir la operacion con una gota de lugol en lugar de la solucion salina.

ventajas y desventajas:
a) ventajas
-la sencillez y rapidez para llevar a cabo este metodo, ademas de la economia en su realizacion.
-ambos tipos de montaje se pueden preparar en un mismo portaobjetos.
-esta tecnica es la más util para encontrar trofozoitos de amibas y flagelados.
-permite observar la movilidad de los organismos, la cual con mucha frecuencia es caracteristica y sirve para hacer identificacion exacta.
b) desventajas
-las preparaciones con lugol, pueden destruir las formas sensibles como los trofozoitos.
-la muestra utilizada es tan pequeña que es poco representativa.

precauciones:
-una preparacion satisfactoria debe tener densidad ligeramente opaca, pero ser lo bastante delgada que permita leer las letras a traves de esta.
-se deben ver perfectamente los elementos en la preparacion; sin que se dificulte la observacion por el exceso de burbujas y detritos microscopicos.
-en heces liquidas y semiliquidas hay que seleccionar el moco sanguinolento o los esfacelos delgados del tejido y en heces formadas, hacer raspados para obtener material de la superficie en varias partes de la masa fecal.
-utilizar intensidad luminica baja.
-examinar por lo menos tresmuestras antes de considerar negativos los resultados.
-la materia fecal es potencialmente infectante, por lo que se debera tener los cuidados necesarios para su manejo.

autoevaluacion:
¿que es la solucion salina isotonica? : liquido que tiene las caracteristicas y condiciones semejantes a las del cuerpo.

observaciones:
genero y especie del parasito: se encontro una bacteria esterichia coli
estadios vital: ninguno
aumento utilizado: seco debil (10x) y seco fuerte (40x)
estructuras observadas: fibras musculares parcialmente digeridas, restos vegetales.
genero y especie del parasito: quiste de entamoeba histolytica.
estadios vital: ninguno
aumento utilizado: seco debil (10x) y seco fuerte (40x)
estructuras observadas:  celulosa vegetal, tejido elastico, cristales de acidos grazos, celulas llenas de almidon.

conclusiones:
este metodo es muy facil y barato pero no es muy exacto y se tiene que hacer tres o más veces para dar un diagnostico. debemos tener cuidado para que la muestra tampoco quede espesa y no sirva. hay que obtener la muestra de heces con moco y sangre por que ahi estan los parasitos. nuestro paciente no estaba enfermo por eso no encontramos entamoeba histyolitica, pero si esterichia coli (bacteria).

evidencia: